基因擴(kuò)增儀是利用PCR,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對特殊DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備??蛇x擇梯度運算功能,用戶可預(yù)測溫度曲線。整個梯度顯示非常好的線性關(guān)系。計算的溫度與實測溫度非常接近。主要用于用于定性PCR基因擴(kuò)增、熒光/酶免終點定量DNA基因擴(kuò)增、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴(kuò)增等。
使用步驟:
1、準(zhǔn)備好反應(yīng)管;
2、打開機蓋,將反應(yīng)管平穩(wěn)、端正的置入,蓋好機蓋;
3、打開電源開關(guān),按照機器屏幕顯示的提示設(shè)定程序,待風(fēng)機停止工作關(guān)閉電源;
4、機器工作時嚴(yán)禁打開機蓋;
5、要定期使用肥皂水潔洗儀器的樣品槽,不能使用強堿,高濃度酒精和有機溶劑擦洗。
基因擴(kuò)增儀分類:
1、普通的基因擴(kuò)增儀
把一次PCR擴(kuò)增只能運行一個特別退火溫度的PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是做簡單的,對目的基因退火溫度的擴(kuò)增。
2、梯度基因擴(kuò)增儀
把一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常有12種溫度梯度,這樣的儀器就叫梯度PCR儀。因為被擴(kuò)增的不同DNA片段,其最適退火溫度事不同,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增,就可以篩選出表達(dá)量高的*適退火溫度,進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
3、原位基因擴(kuò)增儀
用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀,是保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置。
4、實時熒光定量基因擴(kuò)增儀
在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同,只是PCR擴(kuò)增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。